紅外拉曼顯微鏡是一種結合紅外吸收光譜與拉曼散射光譜的顯微分析技術,其技術原理與核心特點如下:
一、技術原理。
?紅外光譜原理?:紅外光譜基于分子振動能級躍遷引起的紅外光吸收。當特定波長紅外光照射樣品時,分子偶極矩變化的振動會選擇性吸收光子能量,形成特征吸收峰(如C=O、N-H鍵)。傳統紅外顯微鏡受衍射限制,空間分辨率僅10-20微米,但光熱紅外技術(O-PTIR)通過可見光探針檢測紅外光熱效應,突破至亞微米級分辨率。
?拉曼光譜原理?:拉曼光譜源于光子與分子之間的非彈性散射。當入射光誘導分子極化率變化時,散射光頻率發生偏移,偏移量對應分子振動能級差異。拉曼顯微鏡利用可見激光(如532nm、785nm)實現高分辨率(0.5微米)化學成像,適用于玻璃、金屬等紅外難測樣品。
?顯微技術整合?:通過共聚焦光學系統與光譜儀結合,兩種技術共享顯微鏡平臺。通過軟件切換紅外與拉曼模式,同步采集同一微區的雙模態數據,提升分析效率。
二、核心特點
?雙模態互補分析?:紅外對極性官能團(如-OH、C=O)敏感,拉曼擅長檢測共軛體系(如芳香環、C≡C鍵),兩者結合可覆蓋更廣的化學鍵振動模式。適用于異質材料(如聚合物共混物、微塑料)的成分分布解析及微量污染物定位。
?高空間分辨率?:紅外顯微通過O-PTIR技術將分辨率提升至500nm級別,拉曼顯微鏡利用可見光波長優勢可達0.5μm,突破傳統紅外顯微的衍射極限。新型光熱顯微鏡結合受激拉曼效應,實現毫米級穿透深度與微米級分辨率,適用于深層生物組織成像。
?非破壞性與無標記檢測?:無需樣品染色或切片,支持反射模式下的非接觸測量,減少污染風險,適用于活細胞、文物等珍貴樣本分析。支持3D共聚焦成像,可表征多層材料或密閉容器內部成分。
?高靈敏度與操作便捷性?:先進濾波技術(如介電濾波)有效抑制瑞利散射干擾,提升拉曼信號信噪比。
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